水产学报 , 2016, 40(12):1915-. doi:10.11964/jfc.20160110240
摘要:为研究鲤疱疹病毒Ⅱ型(CyHV-2)体外感染复制特征以及异育银鲫抗病毒免疫应答反应。本实验采用组织块培养法建立了异育银鲫背鳍细胞的原代培养体系。结果显示,在10 d左右可观察到组织块迁移分离出新的单层细胞,3周左右细胞可覆盖底部面积为25 cm2培养瓶的底部;经CyHV-2悬液感染离体培养的原代细胞,3 d后病毒滴度增殖至106拷贝/mL;在病毒感染6 d后出现典型的细胞病变效应;CyHV-2感染原代细胞后,分析前期通过鱼体水平实验鉴定出的与该病毒感染相关的免疫基因:PNP5aMPOMHCⅠ、LYZ-CIL-11、ITLNPNP5aDUSP,Real-time Rt-PCR结果显示大部分基因在细胞水平均有显著性的上调,与鱼体水平实验结果一致。本研究建立了原代培养的异育银鲫背鳍细胞,用于构建体外感染CyHV-2病毒的细胞模型,为深入研究CyHV-2的感染复制规律及其与宿主的相互作用关系,以及细胞水平筛选抗病毒药物实验奠定了基础。