渔业科学进展 , 2019, 40(4):131-. doi:10.19663/j.issn2095-9869.20180510001
摘要:为探索广东紫菜(Pyropia guangdongensis)叶状体Hsp70基因在温度刺激下机体耐温相关分子机制,为广东紫菜的栽培生产提供技术参考,本研究利用RACE技术获得了广东紫菜Hsp70基因(PgHsp70)全长序列,并在此基础上采用实时荧光定量PCR技术,研究广东紫菜叶状体分别在不同温度(22℃、27℃和31℃)条件下处理0、1/6、1/2、1、6、12、24和36 h后PgHsp70基因的差异表达。结果显示,PgHsp70基因序列长2004 bp,包含一个1866 bp的开放阅读框,可编码621个氨基酸,预测分子量为67.7 kDa,理论等电点为4.87。基因表达水平定量分析表明,温度对PgHsp70基因表达水平有显著影响,PgHsp70基因在不同温度的表达水平变化趋势基本一致,均呈现先上调后下降的趋势,且均于1 h表达量到达最高水平,其中,在31℃ 1 h表达量最高,为未经高温处理组的11倍,说明PgHsp70基因在应答高温胁迫中发挥着重要的作用。
大连海洋大学学报 , 2022, 37(4):707-. doi:10.16535/j.cnki.dlhyxb.2021-191
摘要:Hsp70(热休克蛋白70,heat shock protein 70)是一种分子伴侣蛋白,广泛存在于原核和真核等生物中,在分子伴侣网络中处于核心位置,几乎参与蛋白从合成、折叠、组装到降解的全过程,还具有抗逆境胁迫等多种功能,与其他分子伴侣合作维持细胞蛋白内稳态(protein homeostasis)和生物体健康。本文综述了Hsp70分子内变构机制、Hsp70与底物的相互作用、Hsp70变构机制与其诸多功能的联系,以及Hsp70在水生动物抗逆/病中的潜在应用,针对目前研究中存在的主要问题,提出未来应加强对Hsp70在原位环境中的变构机制、水生动物Hsp70变构机制、Hsp70参与水生动物抗逆/病生理过程和分子机制的研究,以及拓展Hsp70在水生动物育种、免疫强化、抑制细胞凋亡和药物靶点的应用研究等,以期为进一步认识Hsp70家族蛋白多功能作用机制,促进Hsp70在水生动物的应用研究提供科学参考。
中国水产科学 , 2014, 21(5):902-. doi:10.3724/SP.J.1118.2014.00902
摘要:从刺参(Apostichopus japonicus)低盐转录组数据库中选取与应激(热休克蛋白70 基因)和离子传递(甘氨酸转运蛋白基因、锌转运蛋白基因、神经乙酰胆碱受体基因)相关的4 个差异表达基因, 利用qRT-PCR 技术分析这4 个基因在不同组织中的表达水平及低盐对其表达丰度的影响。结果表明甘氨酸转运蛋白基因在刺参呼吸树中表达水平最高, 肠次之, 体腔液表达较低;锌指蛋白基因和神经乙酰胆碱受体基因均在体腔液中表达最高, 肠次之, 在呼吸树中不表达;热休克蛋白70 基因在体腔液中表达量最高, 其次是呼吸树和肠组织。低盐胁迫下这4 种基因的表达量均随着胁迫时间的延长呈波动性增减, 其中甘氨酸转运蛋白在体腔液中的表达低于正常表达水平, 在胁迫后3 h 时达到最低表达量。神经乙酰胆碱受体基因除在体腔液中48 h 出现明显的上调外, 在体腔液其他时间点和肠组织中处于下调表达状态。低盐胁迫下这4 个基因表达丰度的变化, 说明这些基因或作为功能蛋白直接参与机体的代谢调节, 或作为调控蛋白调节胁迫功能蛋白的表达和活性来提高刺参对低盐胁迫的耐受能力。研究结果可为刺参盐度调节适应机制的研究奠定基础。
广东海洋大学学报 , 2023, 43(2):43-. doi:10.3969/j.issn.1673-9159.2023.02.006
摘要:【目的】探究罗勒精油对运前暂养胁迫下珍珠龙胆石斑鱼(Epinephelus fuscoguttatusi♀×Epinepheluslanceolatus♂)氧化应激水平的影响,以期为石斑鱼保活运输应激缓解技术开发提供依据。【方法】分析罗勒精油的暂养浓度与暂养时间对珍珠龙胆石斑鱼无水保活的存活时间及存活率的影响,以及不同暂养时间下石斑鱼血清生化指标与氧化应激相关指标的变化。【结果】10 mg/L罗勒精油暂养处理,能显著延长珍珠龙胆石斑鱼无水保活时间(P < 0.05),延长5.7 h,保活时间为(19.7±0.5)h;暂养24 h处理组的石斑鱼无水保活15 h时存活率仍能保持100%。与空白对照组相比,10 mg/L罗勒精油暂养处理组石斑鱼血清中皮质醇质量浓度、尿素氮浓度以及乳酸脱氢酶酶活力显著降低(P < 0.05),谷草转氨酶酶活力上升速率减缓,石斑鱼肝脏与脑部中丙二醛含量显著降低(P < 0.05),热休克蛋白70的释放显著增加(P < 0.05),随着暂养时间的延长,脑部还原性谷胱甘肽含量与肝脏过氧化氢酶活力的上升趋势减缓,暂养过程血清中葡萄糖消耗速率减缓,肝脏中乳酸积累显著减少(P < 0.05),氧化应激得到缓解。【结论】暂养时加入罗勒精油能促进石斑鱼组织中热休克蛋白70的释放、减少组织中脂质过氧化物丙二醛的产生,降低乳酸的积累。随着暂养时间的延长,暂养胁迫下的应激响应和能量响应上升程度减缓,组织损伤和代谢物的累积减少。暂养时最佳的罗勒精油质量浓度为10 mg/L,可缩短珍珠龙胆石斑鱼所需的暂养时间,并延长石斑鱼在无水保活下的存活时间。
大连海洋大学学报 , 2012, 27(6):502-. doi:
摘要:根据已知巨型管状虫Riftia pachyptila热休克蛋白70(Hsp70)基因序列设计引物,应用同源克隆策略和RACE技术首次从双齿围沙蚕Perinereis aibuhitensis体壁肌肉中克隆获得Hsp70 cDNA序列。结果表明:双齿围沙蚕Hsp70 cDNA序列全长为2336 bp,包括5'端非翻译区88 bp、3'端非翻译区286 bp和开放阅读框1962 bp;整个开放阅读框编码653个氨基酸,包含Hsp70家族3个特征区域;通过生物信息学分析表明,该蛋白是一种无信号肽跨膜蛋白,理论等电点为5.14,相对分子质量为71396,半胱氨酸(Cys)含量为0.8%;同源性分析表明,双齿围沙蚕Hsp70氨基酸序列与其他真核生物的Hsp70序列具有很高的相似性。该研究结果可为进一步开发沙蚕Hsp70作为监测海洋污染的一种生物标记物提供重要的参考依据。