渔业科学进展 , 2017, 38(5):122-. doi:10.11758/yykxjz.20160510001
摘要:以浒苔、石莼、豆粕、扇贝边、葡萄糖、贝壳粉、维生素和矿物质预混料为原料配制刺参(Apostichopus japonicus)饲料,利用酿酒酵母菌菌液和碱性蛋白酶制剂对刺参饲料进行4种不同的处理,得到5组实验用饲料,分别为对照组、发酵组、酶解组、复合组和鲜浒苔组。将上述饲料饲喂初始体重为(1.92±0.02) g的幼刺参42 d,每种饲料设3个重复,每个重复30头幼刺参。结果显示,不同的浒苔型饲料对幼刺参的存活率(SR)、增重率(WGR)、特定生长率(SGR)和饲料系数(FC)有显著影响(P < 0.05),而对其脏壁比(R)无显著性影响(P > 0.05)。复合组和鲜浒苔组SR要显著高于酶解组(P < 0.05),而与其他2组均无显著性差异(P > 0.05)。鲜浒苔组WGR远高于其他各组(P < 0.05),而复合组和发酵组WGR显著高于酶解组(P < 0.05),与对照组差异不显著(P > 0.05)。幼刺参的SGR规律与WGR一致。鲜浒苔组FC显著低于对照组、发酵组和酶解组(P < 0.05),与复合组差异不显著(P > 0.05)。随着摄食饲料时间的推移,对照组、发酵组、复合组和鲜浒苔组淀粉酶(AMS)活力先升高再下降后趋于稳定,而酶解组一直呈现下降趋势。酶解组纤维素酶(Cellulase)活力呈现一直下降的趋势,而其他组呈现波动变化,且均高于初始活力值。随着摄食饲料时间的推移,除酶解组外,其余各组胰蛋白酶(TRY)活力前后时间点变化差异不大,且每个采样点幼刺参TRY活力大小顺序始终是对照组 > 复合组 > 鲜浒苔组 > 发酵组 > 酶解组。不同浒苔型饲料饲喂的幼刺参体腔液中酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)和超氧化物歧化酶(SOD)活力均有显著性差异(P < 0.05)。鲜浒苔组ACP活力最大,且与复合组无显著性差异(P > 0.05),而显著高于其他3组(P < 0.05)。鲜浒苔组和复合组AKP活力显著高于酶解组和对照组(P < 0.05),与发酵组无显著性差异(P > 0.05)。复合组SOD活力最大,且显著高于发酵组和酶解组(P < 0.05),而与对照组和鲜浒苔组均无显著性差异(P > 0.05)。由此得出,幼刺参在摄食先酶解后发酵的饲料后能够得到良好的生长效果,并可改善自身肠道消化,维持正常免疫。这为解决刺参饲料原料短缺以及浒苔高值化利用提供了依据和方法。
水产学报 , 2017, 41(6):962-. doi:10.11964/jfc.20170110687
摘要:为有效提高鲣鳔蛋白的附加值,研究以DPPH自由基清除率为抗氧化活性评价指标,采用蛋白酶酶解制备活性多肽的工艺,选用菠萝蛋白酶、复合蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶、中性蛋白酶7种酶在各自最适的条件下酶解,筛选出复合蛋白酶为最适用酶,通过单因素实验分别研究加酶量、溶液初始pH、酶解温度和时间对酶解物抗氧化活性的影响,在此基础上,根据响应面法优化鲣鳔抗氧化酶解物的制备工艺。结果显示,最佳酶解工艺条件为加酶量8.53 U/mg,pH 5.54,温度50.03 °C,时间5.07 h。此外,利用超滤法对最佳条件下制备的酶解物进行初步分级,得到分子质量分别为大于10 000 u、3000~10 000 u和小于3000 u的3段组分,且这3段组分对DPPH自由基的半抑制浓度IC50值分别为0.64、0.52和0.37 mg/mL。研究表明,最优条件下制备的酶解物的DPPH清除率达72.00%,与模型预测值71.60%接近,且其中小于3000 u的组分具有较强的DPPH自由基清除活性。
集美大学学报(自然科学版) , 2018, 23(2):105-. doi:
摘要:)以低值海地瓜(Acaudina molpadioides)体壁干品为实验原料,优化酶解超滤工艺条件,联合制备出不同分子质量段的海地瓜多糖和多肽,优化确定柱层析法分离纯化海地瓜多糖的工艺参数,对比探究不同分子质量段海地瓜多糖和多肽的体外抗氧化活性。结果表明:先用胰蛋白酶在料液比(m/V)1∶40、加酶量2.4%(质量分数)、pH值7.5、45℃下酶解8 h,然后超滤分离得到分子质量小于10 ku的海地瓜多肽,提取率达到(29.602±1.012)%;再用中性蛋白酶和木瓜蛋白酶复合使用对超滤截留液和一次酶解沉淀进行二次酶解提取多糖,先加入质量分数7%的中性蛋白酶,45℃下酶解4 h;再加入质量分数8%的木瓜蛋白酶,60℃下酶解4 h,pH值均为7.0,粗多糖提取率达到(14.511±0.162)%。确定最佳超滤条件为:操作压力0.20 MPa,料液质量分数6%,操作温度35℃。得到海地瓜多肽P1(5~10 ku,48.47%)、P2(1~5 ku,18.46%)和P3(<1 ku,33.07%);得到海地瓜粗多糖G1(<10 ku,63.09%)、G2(10~100 ku,7.24%)、G3(100~200 ku,4.67%)和G4( > 200 ku,25.00%)。采用Q-Sepharose-Fast-Flow阴离子交换柱层析法对G4进行纯化,在0,0.5,1.5 mol/L洗脱盐浓度下,得到3个纯化多糖组分G4-1、G4-2和G4-3。体外抗氧化活性检测结果显示,不同分子质量段海地瓜多肽对·OH的清除能力强弱顺序为:P3 > P2 > P1,对DPPH·和O-2·的清除能力强弱顺序均为:P2 > P3 > P1。不同海地瓜粗多糖对·OH、DPPH·和O-2·的清除能力强弱顺序依次为:G4 > G1 > G3 > G2,G4 > G3 > G1 > G2,G1 > G4 > G2 > G3;纯化多糖对·OH的清除能力强弱顺序为:G4-1 > G4-2 > G4-3,对DPPH·和O-2·的清除能力强弱顺序均为:G4-2 > G4-1 > G4-3
大连海洋大学学报 , 2019, 34(3):419-. doi:10.16535/j.cnki.dlhyxb.2019.03.018
摘要:为高效开发利用魁蚶Scapharca broughtonii加工副产物,以水解度、氨基态氮含量和产物相对分子质量分布为指标,筛选了碱性蛋白酶、风味蛋白酶、酸性蛋白酶、中性蛋白酶、胰蛋白酶5种蛋白酶,通过单因素和响应面试验,建立碱性蛋白酶最佳酶解工艺,并对最优工艺条件下酶解产物的抗氧化效果进行测定。结果表明:从氨基态氮含量和水解度的变化可知,碱性蛋白酶的酶解程度最高,其次为风味蛋白酶和酸性蛋白酶,中性蛋白酶和胰蛋白酶的酶解效果不佳;碱性蛋白酶酶解最佳参数条件为料液比(g:mL)1:4、pH 8.5、温度45℃、加酶量800 U/g、酶解时间3 h,在此条件下,水解度(DH)为35.74%;酶解产物具有明显的抗氧化效果,与十分之一用量的VC效果相当。研究表明,碱性蛋白酶是酶解魁蚶加工副产物获得较多小分子蛋白肽的良好用酶,本研究结果可为小肽型水产饲料开发提供基础数据。
广东海洋大学学报 , 2020, 40(3):99-. doi:10.3969/j.issn.1673-9159.2020.03.013
摘要:【目的】研究三角帆蚌(Hyriopsis cumingii)肉酶解产物的解酒防醉作用。【方法】以乙醇脱氢酶(ADH)激活率为指标,在单因素试验基础上响应面优化三角帆蚌肉酶解工艺,制备三角帆蚌肉酶解产物(Enzymatic hydrolysate from soft tissue of Hyriopsis cumingii,EH),并测定EH对饮酒小鼠醉酒状态、血液中乙醇浓度和肝脏ADH活力的影响,以评价其醒酒活性。【结果】选用中性蛋白酶为实验用酶,三角帆蚌肉的最佳酶解条件为酶解时间2.0 h、酶解温度50.0℃、料液比1∶3、加酶量1 000 U/g,在此条件下ADH激活率为18.30%。小鼠摄入EH 300 mg/kg时,饮酒小鼠醉酒只数少,酒后90 min血乙醇浓度已降至8.80 mmol/L,肝脏ADH活力上升至7.64 U/mg。【结论】三角帆蚌肉酶解产物能够显著激活肝脏ADH,降低血乙醇浓度,具有较好的醒酒功效和应用前景。
南方水产科学 , 2013, 9(6):47-. doi:10.3969/j.issn.2095-0780.2013.06.008
摘要:刺参(Apostichopus japonicus)肠和性腺是刺参加工过程中的副产物,为丰富其高值化利用的基础理论,研究了刺参肠、性腺酶解过程中可溶性蛋白和氨基酸态氮质量浓度变化,分析了酶解多肽对1,1-二苯基苦基苯肼(DPPH·)、羟基自由基(·OH)和超氧阴离子自由基(O2-·)的体外清除效果。结果显示,刺参肠和性腺经生物酶水解后,水解度分别为53.63%和63.40%,酶解液中可溶性蛋白质量浓度分别为4.62 mg·mL-1和5.01 mg·mL-1,氨基酸态氮质量浓度分别为0.43 mg·mL-1和0.56 mg·mL-1。刺参肠和刺参性腺酶解多肽清除DPPH·的半抑制质量浓度(IC50)分别为3.31 mg·mL-1和0.88 mg·mL-1,清除·OH的IC50分别为9.53 mg·mL-1和8.81 mg·mL-1,清除O2-·的IC50分别为6.42 mg·mL-1和3.22 mg·mL-1。刺参肠和刺参性腺酶解多肽具有一定的体外抗氧化效果,应用前景广阔。
上海海洋大学学报 , 2019, 28(2):305-. doi:10.12024/jsou.20180702365
摘要:采用复合蛋白酶酶解南极磷虾得到虾粉多肽,经超滤分离和高速逆流色谱技术进行分离纯化并检验其体外抗氧化活性。结果表明:经超滤分离后的多肽在分子量范围为5~10 ku时多肽抗氧化活性最好,当浓度为10 mg/mL时,其超氧阴离子自由基清除率达到21.28%,DPPH自由基清除率为86.52%,对羟基自由基清除率为53.49%,Fe2+螯合率为85.35%。对分子量范围在5~10 ku的多肽进行高速逆流色谱分析,采用体积比为氯仿:丁醇:甲醇:水=4:0.75:3:2作为两相溶剂体系,下相作固定相,上相作流动相;反转,转速900 r/min,恒温水浴温度为25℃,在流动相的流速1.5 mL/min,进样浓度20 mg/mL的条件下分离得到5个组分。经测定:当浓度为5 mg/mL时,P3组分清除超氧阴离子自由基的能力和Fe2+螯合能力均显著高于其余4个组分,分别为37.18%和92.33%,P2组分的DPPH自由基清除率最高,为90.33%,P5组分的羟基自由基清除率最高,为70.11%。与未经HSCCC分离的对照组相比,抗氧化活性均得到明显增强。
大连海洋大学学报 , 2004, 19(2):87-. doi:
摘要:通过测定鲢Hypophthalmichthys molitrix头酶解物对血管紧张素转化酶(ACE)的抑制率(I),确定了蛋白酶酶解鲢头制取ACE抑制肽(ACEI)的酶种及其最佳酶解工艺条件,并用Sephadex G-15凝胶柱对酶解物进行分离,测定酶解物中ACE抑制肽的相对分子质量分布。结果表明:在胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、胃蛋白酶、枯草杆菌蛋白酶和复合风味蛋白酶5种酶中,胃蛋白酶为酶解鲢头制备ACE抑制肽的理想蛋白酶;其最佳酶解工艺条件为温度37℃、pH2.0、酶解时间3h、酶的质量分数为1.4%、底物浓度ω(原料):ω(水)=1:3,在该条件下得到的酶解物对ACE的抑制活性最强,其I=83.58%;在最佳酶解工艺条件下得到的酶解物经层析分离,在最大洗脱峰处得到的ACE抑制肽抑制活性最高,其I=86.72%,相对分子质量为1096。
广东海洋大学学报 , 2020, 40(2):71-. doi:10.3969/j.issn.1673-9159.2020.02.010
摘要:【目的】优化黄鳍金枪鱼(Thunnus albacares)副产品(鱼头)提取鱼油的工艺参数。【方法】以鱼油提取率为评价指标,采用单因素实验确定最佳超高压处理压强和保压时间,采用Box-Behnken响应面试验设计优化关键酶解工艺参数。【结果】建立鱼油提取率与加酶量、液料质量比、酶解温度和酶解时间之间的回归模型,加酶量、液料质量比、酶解温度和酶解时间对鱼油提取率均有显著影响(P<0.05),影响由高到低依次为加酶量、液料质量比、酶解时间、酶解温度;当超高压处理压强200 MPa、处理时间10 min、加酶量(质量分数)为1.125%、液料质量比为1∶1、酶解温度65℃和酶解时间60 min时,根据质量法计算,鱼油提取率达99.51%,与模型预测值之间差异无统计学意义(P>0.05)。【结论】采用响应面法建立的回归模型较好地描述超高压结合酶解提取鱼油的工艺过程,优化的工艺参数可有效提高鱼油提取率。
广东海洋大学学报 , 2020, 40(4):92-. doi:10.3969/j.issn.1673-9159.2020.04.013
摘要:【目的】为了提高石斑鱼加工副产物的生物价值,对石斑鱼头中抗氧化活性物质进行分离与功能性质分析。【方法】以珍珠龙胆石斑鱼头为原料,采用生物酶解法,以水解度和DPPH自由基清除率为指标,通过单因素试验和响应面法优化酶解工艺;酶解产物经不同分子质量的超滤膜进行分离,对分离各级分的体外抗氧化活性与功能性质进行研究。【结果】石斑鱼头酶解产物的最佳制备条件是:风味蛋白酶添加量3 000 U/g,在pH 7.0,酶解温度为45℃、底物质量浓度300 mg/mL下酶解4.5 h,得到的石斑鱼头粗酶解产物的水解度为(20.27±1.28)%。分子质量<3 ku的酶解产物(EHH-1)蛋白质质量分数为(13.18±1.17)%,抗氧化活性最显著,其对DPPH自由基、羟自由基、超氧阴离子自由基清除作用的IC50值分别为0.35、4.60、0.46 mg/mL;在pH4.0~8.0之间均具有较好溶解性,氮溶指数达到(75.08~87.50)%,热稳定性达到(70.00~82.00)%,乳化活性为(23.52~37.45)m2/g。【结论】石斑鱼头酶解产物分子质量<3 ku的超滤级分具有较强的抗氧化性与良好的功能性质,在天然抗氧化剂和食品加工领域有潜在的利用价值。