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李莎莎 , 曹煜成 , 李卓佳 , 胡晓娟 , 徐煜 , 徐武杰 , 杨铿 , 苏浩昌 , 文国樑

渔业科学进展 , 2017, 38(6):119-. doi:10.11758/yykxjz.20160923001

摘要：芽孢杆菌（Bacillus sp.） A4是一株具有溶甲藻能力的菌株，为探究营养条件与培养条件对A4生长的影响，明确在多因素共同作用下菌株的生长特性，先以单因素方法比较不同碳、氮营养因子对其生长的影响，再以Plackett-Burman方法综合比较碳源、氮源、pH、接种菌量、温度、转速、装液量等因子对其生长的协同影响效应。结果显示，A4菌对有机碳源玉米浆和有机氮源大豆蛋白利用效果最好，培养24 h后菌量分别达到3.58×10⁸、3.19×10⁸ CFU/ml。各因子的重要性排序依次为大豆蛋白、温度、玉米浆、转速、接种菌量、pH、装液量，且大豆蛋白和温度对A4菌的生长影响显著（P < 0.05）。研究表明，培养条件对菌株生长调控也有重要意义，在评估相关因素对菌株生长或生态功能的影响时，须将营养条件和培养条件协同分析。

关键词：芽孢杆菌 , 碳源 , 氮源 , 培养条件

溶藻细菌A3的溶藻特性

郗建云 , 曹煜成 , 徐武杰 , 胡晓娟 , 徐煜 , 许云娜 , 李卓佳 , 文国樑 , 李莎莎

渔业科学进展 , 2016, 37(6):151-. doi:10.11758/yykxjz.20160426002

摘要：本研究以锥状斯氏藻（Scrippsiella trochoidea）、蛋白核小球藻（Chlorella pyrenoidosa）、四尾栅藻（Scenedesmus quadricauda）、条纹小环藻（Cyclotella striata）作为实验藻种，将浓度为107 CFU/ml的菌株A3分别加入到4种微藻的单种藻液、2种藻混合藻液、3种藻混合藻液中，每48 h观察藻细胞形态并统计藻细胞数量，实验周期为10 d，以探究菌株A3对4种微藻的溶藻效果。结果显示，在单种藻实验中，加菌组锥状斯氏藻细胞于第1天失去运动活性，细胞拉长变形，第5天细胞壁破裂溶解，第10天细胞密度为7.07×10² cells/ml，显著低于对照组的2.90×10⁴ cells/ml（P<0.05）；实验期间，加菌组蛋白核小球藻细胞形态保持完整，第10天藻细胞密度为2.58×10⁷ cells/ml，显著高于对照组的2.09×10⁷ cells/ml（P<0.05）；加菌组四尾栅藻细胞形态保持完整，与对照组藻细胞密度无显著差异（P>0.05）；加菌组条纹小环藻细胞于第8天溶解，第10天对照组与加菌组藻细胞密度分别为4.38×10⁵ cells/ml、1.78×10⁵ cells/ml，加菌组藻细胞密度显著低于对照组（P<0.05）。混合藻实验中，菌株A3对各种微藻的溶藻效果与单种藻实验结果类似，菌株A3对锥状斯氏藻生长具有显著的溶藻作用，对蛋白核小球藻与四尾栅藻无溶藻作用，对条纹小环藻生长具有较弱的溶藻作用。研究表明，菌株A3具有溶藻选择性，对锥状斯氏藻具有显著的溶藻作用，而对其他3种藻无溶藻作用或溶藻作用相对较弱。

关键词：溶藻菌A3 , 微藻调控 , 溶藻选择性

活性酵素对工厂化养殖凡纳滨对虾生长及水质的影响

杨铿 , 蒋魁 , 洪敏娜 , 徐创文 , 陈海谊 , 胡晓娟 , 曹煜成 , 杨莺莺

中国渔业质量与标准 , 2019, 9(3):1-. doi:10.3969/j.issn.2095-1833.2019.03.001

摘要：通过探究活性酵素对凡纳滨对虾（Litopenaeus vannamei）生长及养殖池水质的影响，为稳定养殖池水质、提高饲料利用率提供技术支持。实验共设3组（实验组A、B和对照组），各组均投喂3餐/天，对照组不拌活性酵素，实验组A、B分别拌活性酵素2餐/天、3餐/天，试验周期为45 d。分别于投喂后的第15、30和45天测定凡纳滨对虾的体长和体重，并每3天测量养殖池pH、温度、溶解氧（DO）、氨氮和亚硝酸氮含量等水质指标，初始氨氮、亚硝酸氮含量均未检出。结果显示，使用活性酵素的2个实验组均能促进凡纳滨对虾的生长，拌料2餐的实验组A增重率为（962.02±13.55）%，高于拌料3餐的实验组B（726.58±16.04）%，实验组A体长为（5.50±0.14） cm，高于实验组B（4.70±0.15） cm，促生长作用显著（P<0.05），说明活性酵素拌料2餐/天投喂为宜。对照组养殖池水的氨氮、亚硝酸氮含量波动大，分别高达（2.70±0.03） mg/L和（0.31±0.01） mg/L，而2个实验组的氨氮、亚硝酸氮含量始终低于0.5 mg/L和0.1 mg/L的安全浓度水平，表明活性酵素在稳定养殖池氨氮、亚硝酸氮含量方面的作用显著。3组的养殖池DO范围为10~13 mg/L、温度范围为19~23℃、pH值范围为7.5~8.4，表明活性酵素对养殖池DO、温度、pH无明显影响。上述结果说明，活性酵素拌料按照2餐/天投喂可显著提高凡纳滨对虾生长速度，同时能够有效抑制养殖池水中氨氮、亚硝酸氮含量的增加，调节改善养殖池水质。

关键词：活性酵素 , 凡纳滨对虾 , 水质 , 生长 , 氨氮 , 亚硝酸氮 , 溶解氧 , 工厂化养殖

罗非鱼养殖系统中蛋白酶产生菌株的筛选和鉴定

文国樑 , 袁翠霖 , 李卓佳 , 杨莺莺 , 曹煜成 , 洪敏娜 , 胡晓娟 , 林小涛

中国渔业质量与标准 , 2014, 4(1):38-. doi:

摘要：采用平板透明圈法的定性筛选和 Folin-酚试剂定量检测筛选相结合, 从罗非鱼养殖系统分离的优势菌中进行蛋白酶产生菌株的筛选, 并对其进行 16S rDNA 细菌鉴定。结果显示, 84株优势菌中共有 15 株蛋白酶产生菌株, 其中10 株具有较高的蛋白酶活力(> 45.0 U/mL), 分别为 D45、D21、D18、D11、D55、D30、D7、D50、D51和 D53, 以菌株 D51和 D53 的蛋白酶活力最强, 其最高酶活力均大于70.0 U/mL。将各菌株进行16S rDNA 鉴定, 初步认定菌株 D50、D11、D18和 D21 属于 Bacillus sp. ; 菌株 D45、D51和 D53 属于 Exiguobacterium sp. ; 菌株 D55 属于 Aeromonas sp. ; 菌株 D30属于 Agrobacterium sp. ; 菌株 D7 属于 Pseudomonas sp.。此10 株具有较高蛋白酶活力的菌株可作为水产养殖益生菌的潜在菌源, 从而提高水产动物对蛋白的利用效率, 减少养殖过程氮的排放。

关键词：罗非鱼养殖系统 , 蛋白酶产生菌 , 筛选 , 鉴定

颤藻浓度和水温对凡纳滨对虾响应颤藻粗提液毒性的影响

徐煜 , 徐武杰 , 文国樑 , 胡晓娟 , 苏浩昌 , 杨铿 , 李卓佳 , 曹煜成

南方水产科学 , 2017, 13(1):26-. doi:10.3969/j.issn.2095-0780.2017.01.004

摘要：文章研究了绿色颤藻(Oscillatoria chlorina)不同成分对凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)的毒性，分析了颤藻浓度与水温对对虾响应粗提液毒性的影响，并初步检测了颤藻粗提液所含的毒素。结果显示，湿藻质量浓度为5.04 mg · mL^-1的颤藻细胞及其粗提液可导致93.72%以上的对虾死亡，藻细胞培养液对对虾无致死效应。用湿藻质量浓度高于2.52 mg · mL^-1的粗提液注射对虾，对虾死亡率超过86.67%，随质量浓度低至0.504 mg ·mL^-1，对虾死亡率降至2.22%，差异显著(P < 0.05)；水温显著影响了粗提液对对虾的致死效应(P < 0.05)，湿藻质量浓度为2.52 mg · mL^-1的粗提液在22 ℃水温条件下可引起20.0%对虾死亡，当温度升至34 ℃，对虾死亡率增加至97.8%；以微囊藻毒素(Microcystin-RR/YR/LR，MC-RR/YR/LR)作标准品，使用高效液相色谱法检测颤藻粗提液毒素，结果在粗提液中均未检出RR、YR、LR等3种常见的微囊藻毒素。结果表明，绿色颤藻可致对虾急性死亡，其主要有害成分是颤藻粗提液所含的非MC-RR/YR/LR等藻毒素，对虾对颤藻粗提液毒性的响应与颤藻浓度和水温显著相关(P < 0.05)。

关键词：绿色颤藻 , 粗提液 , 颤藻浓度 , 水温 , 凡纳滨对虾

响应面法优化芽孢杆菌(Bacillus sp.)A4的培养参数

李莎莎 , 曹煜成 , 胡晓娟 , 李卓佳 , 徐煜 , 杨铿 , 徐创文 , 文国樑

南方水产科学 , 2017, 13(5):85-. doi:10.3969/j.issn.2095-0780.2017.05.012

摘要：为了提高芽孢杆菌(Bacillus sp.)A4的菌浓度, 采用响应面法对其培养参数进行优化。以单因素实验为基础, 筛选适合A4菌生长的碳源和氮源, 采用Plackett-Burman实验方法确定影响菌浓度的显著因子; 通过最陡爬坡实验逼近菌浓度最大值响应稳定区域; 最后根据Box-Behnken实验确定显著因子的最佳水平, 建立相关参数的回归方程, 得到优化培养参数, 并以摇瓶培养实验验证理论参数及方程的科学性。结果显示, 最适碳源、氮源分别为玉米浆、大豆蛋白, 且它们与温度均为显著影响A4菌浓度的因子, 其最适水平分别为20.06 g · L^-1、13.29 g · L^-1、30.26 ℃。采用优化后的参数进行摇瓶培养(24 h), A4菌浓度达1.19×10⁹ CFU · mL^-1, 与理论计算值(1.24×10⁹ CFU · mL^-1)无显著差异(P>0.05), 但显著高于未优化菌株培养浓度(2.69×10⁷ CFU · mL^-1) (P < 0.01)。可见, 运用响应面法优化芽孢杆菌A4的培养参数, 能显著提高A4菌的菌浓度

关键词：芽孢杆菌 , 溶藻菌 , 培养参数 , 响应面法

宁夏地区不同模式养殖池塘夏季浮游微藻群落特征

刘锦帆 , 胡晓娟 , 曹煜成 , 许云娜 , 文国樑 , 李力 , 孙真 , 沈斌

渔业科学进展 , 2023, 44(2):161-. doi:10.19663/j.issn2095-9869.20220517002

摘要：为研究宁夏地区夏季不同模式养殖池塘的浮游微藻群落结构特征，采集了当地棚塘接力养殖（PT）、稻渔种养（DY）、土池养殖（TC）3种模式的池塘水体样品，分析了其浮游微藻群落组成及其与水质因子的相关性。结果显示，共检出浮游微藻5门27属，总数量为1.52×10⁴~2.39×10⁸ind./L，生物量为0.16~97.78 mg/L，数量多样性为0.03~3.31，生物量多样性为0.29~3.58。不同模式池塘的浮游微藻群落结构差异显著。PT模式池塘的微藻群落无明显共性特征，蓝藻（Cyanophyta）、绿藻（Chlorophyta）和硅藻（Bacillariophyta）占优势情况均有出现，如拟鱼腥藻（Anabaenopsis sp.）、鱼腥藻（Anabaena sp.）、颤藻（Oscillatoria sp.）、盘星藻（Pediastrumsp.）、卵囊藻（Oocystis sp.）、小环藻（Cyclotella sp.）等；TC模式池塘的微藻优势属单一，分别以盘星藻、小球藻（Chlorella sp.）和微囊藻（Microcystis sp.）占优势；DY模式池塘的微藻多样性丰富，以小球藻、栅藻（Scenedesmus sp.）、盘星藻、卵囊藻、刚毛藻（Cladophora sp.）等绿藻和小环藻、菱形藻（Nitzschia sp.）等硅藻为优势藻。蓝藻生物量与水体中硝酸盐氮（NO₃^--N）、亚硝酸盐氮（NO₂^--N）、化学需氧量（COD）浓度呈显著正相关（P<0.05）。研究表明，宁夏地区夏季温度高、光照时间长，池塘水体中C、N营养高，易形成以微囊藻、拟鱼腥藻等有害蓝藻优势种群；调控池塘水质时应将其作为关键控制点之一，防控有害藻华暴发而导致减产降效的不良状况发生。

关键词：微藻群落 , 水质 , 宁夏 , 盐碱水池塘

渔用氧化剂对水源水和池塘水中磺胺类抗性基因sul1的去除作用

赵晓雨 , 苏浩昌 , 徐煜 , 徐武杰 , 胡晓娟 , 文国樑 , 曹煜成 , 余招龙

南方水产科学 , 2021, 17(3):46-. doi:10.12131/20200231

摘要：为探讨利用渔用氧化剂去除养殖水体环境中的抗生素抗性基因 (Antibiotic resistant genes, ARGs) 并控制其传播的可行性，该研究以磺胺类抗性基因sul1作为目标抗性基因，选用次氯酸钠 (NaClO)、二溴海因 (C₅H₆Br₂N₂O₂) 和高锰酸钾 (KMnO₄) 3种养殖中常用的渔用氧化剂，运用实时荧光定量PCR技术，分析目标渔用氧化剂对水源水和池塘水体中ARGs的去除效果。结果显示，测试的水源水和池塘水体中的sul1浓度均处于较高水平，分别达到了10⁵和10⁶ 拷贝·mL⁻¹，而且微生物的细胞内sul1是其主要存在形式；其次，NaClO对各实验组中的sul1均呈现较强的去除效果，C₅H₆Br₂N₂O₂仅对水源水中细胞内和细胞外的sul1具有较强的去除作用，KMnO₄仅对不同水体中的细胞外sul1具有较强的去除作用。结果表明，3种目标渔用氧化剂中，NaClO对水源水和池塘水体中ARGs的去除效果最好，科学应用NaClO有利于去除水产养殖水环境中的ARGs，进而防控其在养殖过程中的传播。

关键词：抗生素抗性基因 , 渔用氧化剂 , 次氯酸钠 , 二溴海因 , 高锰酸钾

不同培养条件下菌株NB5对氨氮的去除效果研究

胡晓娟 , 文国樑 , 田雅洁 , 苏浩昌 , 徐武杰 , 徐煜 , 许云娜 , 曹煜成

南方水产科学 , 2020, 16(6):89-. doi:10.12131/20200061

摘要：文章研究了从硝化菌群中分离的菌株NB5在不同培养条件下的生长情况及其对氨氮 (NH₄ ⁺-N) 和亚硝氮 (NO₂ ⁻-N) 的去除效果，并对菌株NB5进行了鉴定。结果发现，菌株NB5在盐度25~45、pH 6.0~9.0、15~35 ℃和通气量1~2 L·min⁻¹的条件下生长良好 (P>0.05)。在盐度45、35和25条件下对NH₄ ⁺-N的最大去除率分别为96.24%、88.93%和75.08%；pH 7.5和9.0条件下分别为99.53%和99.37%；温度30、25、15和35 ℃条件下分别为99.53%、97.22%、97.29%和71.26%；通气量为2和1 L·min⁻¹时分别为99.87%和99.82%。在上述培养条件下菌株NB5对NH₄ ⁺-N的最大去除率均显著高于对照组和其他条件组 (P<0.05)。菌株NB5在不同培养条件下对NO₂ ⁻-N浓度变化无显著作用 (P>0.05)。经16S rDNA序列分析，菌株NB5鉴定为海水硝酸盐还原菌 (Nitratireductor aquimarinus)。研究表明，菌株NB5具有较好的环境适应性和氨氮去除效果，尤其适合中高盐度 (25~45) 养殖池塘环境。

关键词：海水硝酸盐还原菌 , 氨氮 , 培养条件

光合细菌菌剂和沼泽红假单胞菌对实验水体氮磷营养盐和微生物群落的影响

信艳杰 , 胡晓娟 , 曹煜成 , 徐煜 , 许云娜 , 苏浩昌 , 徐创文 , 文国樑 , 李卓佳

南方水产科学 , 2019, 15(1):31-. doi:10.12131/20180144

摘要：为比较光合细菌菌剂与沼泽红假单胞菌(Rhodopseudomonas palustris)的生理生态特性，分析了不同初始菌量的菌剂PG和菌株PSB-1对实验水体氨氮(

\begin{document}${\rm NH}^+_4{\text -}{\rm N}$\end{document}

)、亚硝氮(

\begin{document}$\small {\rm NO}^-_2{\text -}{\rm N}$\end{document}

)、硝氮(

\begin{document}$\small {{\rm NO}^{-}_{3}}{\text -}{\rm N}$\end{document}

)和活性磷(

\begin{document}${\rm PO}^{3-}_4$\end{document}

-P)的降解效果，通过高通量测序分析了菌剂PG的优势菌组成及实验结束时水体细菌数量和微生物群落组成。结果显示，菌剂PG组对实验水体的

\begin{document}${\rm PO}^{3-}_4$\end{document}

-P、

\begin{document}$ {\rm NO}^-_3$\end{document}

-N和

\begin{document}$ {\rm NO}^-_2$\end{document}

-N有一定的降解作用，其最大降解率分别为40.98%、28.28%和20.12%。菌株PSB-1组仅对实验水体的

\begin{document}${\rm NO}^-_2{\text -}{\rm N}$\end{document}

和

\begin{document}${\rm PO}^{3-}_4{\text -}{\rm P}$\end{document}

有一定的降解效果，其最大降解率分别为14.19%和9.88%。菌剂PG的主要优势菌为红假单胞菌属(Rhodopseudomonas sp.)。实验7 d后实验组水体细菌数量和微生物群落结构发生变化，水体细菌数量增长，形成以异养细菌为优势菌的菌群结构。结果表明光合细菌菌剂PG对水质因子的降解效果优于沼泽红假单胞菌PSB-1，但与报道的高效光合细菌菌株的降解能力存在一定差距。

关键词：光合细菌菌剂 , 沼泽红假单胞菌 , 氮磷营养盐 , 微生物群落 , 高通量测序