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溶藻菌A2对4种微藻的溶藻效果分析

郗建云 , 曹煜成 , 李卓佳 , 文国樑 , 徐武杰 , 郑奇宏 , 李振成 , 许云娜

南方水产科学 , 2016, 12(5):34-. doi:10.3969/j.issn.2095-0780.2016.05.005

摘要：将溶藻菌菌株A2以初始浓度10⁷ CFU·mL^-1接入到锥状斯氏藻（Scrippsiella trochoidea）、条纹小环藻（Cyclotella striata）、蛋白核小球藻（Chlorella pyrenoidosa）和四尾栅藻（Scenedesmus quadricauda）的纯培养与混合培养藻液中，研究A2对不同微藻的溶藻专一性，并通过16S rDNA序列分析对A2菌株进行菌株鉴定。结果表明，经16S rDNA鉴定，菌株A2属于海杆菌属（Marinobacter sp.）；在微藻纯培养与混合培养环境下，A2皆可有效溶解甲藻类的锥状斯氏藻，对硅藻类的条纹小环藻具有一定的溶解效果，对绿藻类的四尾栅藻生长无影响，可以促进绿藻类蛋白核小球藻的生长。在多种微藻共存环境下，A2菌组锥状斯氏藻死亡率可高达98.29%和95.37%，蛋白核小球藻的浓度较对照组提高237.6%。结果表明，菌株A2具有良好的溶藻专一性，可作为研发养殖池塘甲藻调控剂的备选菌株。

关键词：锥状斯氏藻 , 溶藻菌 , 专一性

碳氮营养和培养条件对芽孢杆菌(Bacillussp.)A4生长的影响

李莎莎 , 曹煜成 , 李卓佳 , 胡晓娟 , 徐煜 , 徐武杰 , 杨铿 , 苏浩昌 , 文国樑

渔业科学进展 , 2017, 38(6):119-. doi:10.11758/yykxjz.20160923001

摘要：芽孢杆菌（Bacillus sp.） A4是一株具有溶甲藻能力的菌株，为探究营养条件与培养条件对A4生长的影响，明确在多因素共同作用下菌株的生长特性，先以单因素方法比较不同碳、氮营养因子对其生长的影响，再以Plackett-Burman方法综合比较碳源、氮源、pH、接种菌量、温度、转速、装液量等因子对其生长的协同影响效应。结果显示，A4菌对有机碳源玉米浆和有机氮源大豆蛋白利用效果最好，培养24 h后菌量分别达到3.58×10⁸、3.19×10⁸ CFU/ml。各因子的重要性排序依次为大豆蛋白、温度、玉米浆、转速、接种菌量、pH、装液量，且大豆蛋白和温度对A4菌的生长影响显著（P < 0.05）。研究表明，培养条件对菌株生长调控也有重要意义，在评估相关因素对菌株生长或生态功能的影响时，须将营养条件和培养条件协同分析。

关键词：芽孢杆菌 , 碳源 , 氮源 , 培养条件

溶藻细菌A3的溶藻特性

郗建云 , 曹煜成 , 徐武杰 , 胡晓娟 , 徐煜 , 许云娜 , 李卓佳 , 文国樑 , 李莎莎

渔业科学进展 , 2016, 37(6):151-. doi:10.11758/yykxjz.20160426002

摘要：本研究以锥状斯氏藻（Scrippsiella trochoidea）、蛋白核小球藻（Chlorella pyrenoidosa）、四尾栅藻（Scenedesmus quadricauda）、条纹小环藻（Cyclotella striata）作为实验藻种，将浓度为107 CFU/ml的菌株A3分别加入到4种微藻的单种藻液、2种藻混合藻液、3种藻混合藻液中，每48 h观察藻细胞形态并统计藻细胞数量，实验周期为10 d，以探究菌株A3对4种微藻的溶藻效果。结果显示，在单种藻实验中，加菌组锥状斯氏藻细胞于第1天失去运动活性，细胞拉长变形，第5天细胞壁破裂溶解，第10天细胞密度为7.07×10² cells/ml，显著低于对照组的2.90×10⁴ cells/ml（P<0.05）；实验期间，加菌组蛋白核小球藻细胞形态保持完整，第10天藻细胞密度为2.58×10⁷ cells/ml，显著高于对照组的2.09×10⁷ cells/ml（P<0.05）；加菌组四尾栅藻细胞形态保持完整，与对照组藻细胞密度无显著差异（P>0.05）；加菌组条纹小环藻细胞于第8天溶解，第10天对照组与加菌组藻细胞密度分别为4.38×10⁵ cells/ml、1.78×10⁵ cells/ml，加菌组藻细胞密度显著低于对照组（P<0.05）。混合藻实验中，菌株A3对各种微藻的溶藻效果与单种藻实验结果类似，菌株A3对锥状斯氏藻生长具有显著的溶藻作用，对蛋白核小球藻与四尾栅藻无溶藻作用，对条纹小环藻生长具有较弱的溶藻作用。研究表明，菌株A3具有溶藻选择性，对锥状斯氏藻具有显著的溶藻作用，而对其他3种藻无溶藻作用或溶藻作用相对较弱。

关键词：溶藻菌A3 , 微藻调控 , 溶藻选择性

对虾单养和对虾-罗非鱼混养试验围隔水质动态及产出效果的对比

虞为 , 李卓佳 , 王丽花 , 张晓阳 , 曹煜成 , 文国樑 , 朱长波 , 马广智

中国渔业质量与标准 , 2013, 3(2):89-. doi:

摘要：采用 18 个 36 m2的围隔进行对虾单养和对虾–罗非鱼混养试验, 研究其水质动态及产出效果的差异。试验分为 6 组, 每组3 个围隔。各围隔放养凡纳滨对虾(全长为0.045 cm) 3 000 尾, 放养罗非鱼(体重为201 ±25 g) 分别为0(F 组) 、4(A 组) 、8(B 组) 、12(C 组) 、18(D 组) 和 24 尾(E 组), 放养对虾 1 个月后放养罗非鱼。试验期间各围隔均不进行水交换, 试验周期为 70 d。结果显示, 放养罗非鱼之前各实验围隔水质指标接近; 放养罗非鱼之后, 混养各组水体的氨氮浓度、亚硝氮浓度、COD 和弧菌数量均小于单养组, 其中 C 组水体的氨氮浓度、亚硝氮浓度和弧菌数量与单养组差异显著(p ﹤ 0.05), 且混养组中 C 组水体的上述指标小于其他混养组。混养各组对虾的规格、特定生长率、成活率和净产量均大于单养组, 其中 C 组与单养组差异显著(p ﹤ 0.05), 且混养组中 C 组水体的上述指标大于其他混养组。结果表明, 混养各组的水质状况和产出效果优于单养组, 凡纳滨对虾(放养密度为 8.3 ×105尾/hm2) 和罗非鱼(放养密度为 3 320 尾/hm2) 混养的生态效益和经济效益最佳。

关键词：对虾 , 罗非鱼 , 单养 , 混养 , 水质 , 产量

罗非鱼养殖系统中蛋白酶产生菌株的筛选和鉴定

文国樑 , 袁翠霖 , 李卓佳 , 杨莺莺 , 曹煜成 , 洪敏娜 , 胡晓娟 , 林小涛

中国渔业质量与标准 , 2014, 4(1):38-. doi:

摘要：采用平板透明圈法的定性筛选和 Folin-酚试剂定量检测筛选相结合, 从罗非鱼养殖系统分离的优势菌中进行蛋白酶产生菌株的筛选, 并对其进行 16S rDNA 细菌鉴定。结果显示, 84株优势菌中共有 15 株蛋白酶产生菌株, 其中10 株具有较高的蛋白酶活力(> 45.0 U/mL), 分别为 D45、D21、D18、D11、D55、D30、D7、D50、D51和 D53, 以菌株 D51和 D53 的蛋白酶活力最强, 其最高酶活力均大于70.0 U/mL。将各菌株进行16S rDNA 鉴定, 初步认定菌株 D50、D11、D18和 D21 属于 Bacillus sp. ; 菌株 D45、D51和 D53 属于 Exiguobacterium sp. ; 菌株 D55 属于 Aeromonas sp. ; 菌株 D30属于 Agrobacterium sp. ; 菌株 D7 属于 Pseudomonas sp.。此10 株具有较高蛋白酶活力的菌株可作为水产养殖益生菌的潜在菌源, 从而提高水产动物对蛋白的利用效率, 减少养殖过程氮的排放。

关键词：罗非鱼养殖系统 , 蛋白酶产生菌 , 筛选 , 鉴定

颤藻浓度和水温对凡纳滨对虾响应颤藻粗提液毒性的影响

徐煜 , 徐武杰 , 文国樑 , 胡晓娟 , 苏浩昌 , 杨铿 , 李卓佳 , 曹煜成

南方水产科学 , 2017, 13(1):26-. doi:10.3969/j.issn.2095-0780.2017.01.004

摘要：文章研究了绿色颤藻(Oscillatoria chlorina)不同成分对凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)的毒性，分析了颤藻浓度与水温对对虾响应粗提液毒性的影响，并初步检测了颤藻粗提液所含的毒素。结果显示，湿藻质量浓度为5.04 mg · mL^-1的颤藻细胞及其粗提液可导致93.72%以上的对虾死亡，藻细胞培养液对对虾无致死效应。用湿藻质量浓度高于2.52 mg · mL^-1的粗提液注射对虾，对虾死亡率超过86.67%，随质量浓度低至0.504 mg ·mL^-1，对虾死亡率降至2.22%，差异显著(P < 0.05)；水温显著影响了粗提液对对虾的致死效应(P < 0.05)，湿藻质量浓度为2.52 mg · mL^-1的粗提液在22 ℃水温条件下可引起20.0%对虾死亡，当温度升至34 ℃，对虾死亡率增加至97.8%；以微囊藻毒素(Microcystin-RR/YR/LR，MC-RR/YR/LR)作标准品，使用高效液相色谱法检测颤藻粗提液毒素，结果在粗提液中均未检出RR、YR、LR等3种常见的微囊藻毒素。结果表明，绿色颤藻可致对虾急性死亡，其主要有害成分是颤藻粗提液所含的非MC-RR/YR/LR等藻毒素，对虾对颤藻粗提液毒性的响应与颤藻浓度和水温显著相关(P < 0.05)。

关键词：绿色颤藻 , 粗提液 , 颤藻浓度 , 水温 , 凡纳滨对虾

响应面法优化芽孢杆菌(Bacillus sp.)A4的培养参数

李莎莎 , 曹煜成 , 胡晓娟 , 李卓佳 , 徐煜 , 杨铿 , 徐创文 , 文国樑

南方水产科学 , 2017, 13(5):85-. doi:10.3969/j.issn.2095-0780.2017.05.012

摘要：为了提高芽孢杆菌(Bacillus sp.)A4的菌浓度, 采用响应面法对其培养参数进行优化。以单因素实验为基础, 筛选适合A4菌生长的碳源和氮源, 采用Plackett-Burman实验方法确定影响菌浓度的显著因子; 通过最陡爬坡实验逼近菌浓度最大值响应稳定区域; 最后根据Box-Behnken实验确定显著因子的最佳水平, 建立相关参数的回归方程, 得到优化培养参数, 并以摇瓶培养实验验证理论参数及方程的科学性。结果显示, 最适碳源、氮源分别为玉米浆、大豆蛋白, 且它们与温度均为显著影响A4菌浓度的因子, 其最适水平分别为20.06 g · L^-1、13.29 g · L^-1、30.26 ℃。采用优化后的参数进行摇瓶培养(24 h), A4菌浓度达1.19×10⁹ CFU · mL^-1, 与理论计算值(1.24×10⁹ CFU · mL^-1)无显著差异(P>0.05), 但显著高于未优化菌株培养浓度(2.69×10⁷ CFU · mL^-1) (P < 0.01)。可见, 运用响应面法优化芽孢杆菌A4的培养参数, 能显著提高A4菌的菌浓度

关键词：芽孢杆菌 , 溶藻菌 , 培养参数 , 响应面法

宁夏地区不同模式养殖池塘夏季浮游微藻群落特征

刘锦帆 , 胡晓娟 , 曹煜成 , 许云娜 , 文国樑 , 李力 , 孙真 , 沈斌

渔业科学进展 , 2023, 44(2):161-. doi:10.19663/j.issn2095-9869.20220517002

摘要：为研究宁夏地区夏季不同模式养殖池塘的浮游微藻群落结构特征，采集了当地棚塘接力养殖（PT）、稻渔种养（DY）、土池养殖（TC）3种模式的池塘水体样品，分析了其浮游微藻群落组成及其与水质因子的相关性。结果显示，共检出浮游微藻5门27属，总数量为1.52×10⁴~2.39×10⁸ind./L，生物量为0.16~97.78 mg/L，数量多样性为0.03~3.31，生物量多样性为0.29~3.58。不同模式池塘的浮游微藻群落结构差异显著。PT模式池塘的微藻群落无明显共性特征，蓝藻（Cyanophyta）、绿藻（Chlorophyta）和硅藻（Bacillariophyta）占优势情况均有出现，如拟鱼腥藻（Anabaenopsis sp.）、鱼腥藻（Anabaena sp.）、颤藻（Oscillatoria sp.）、盘星藻（Pediastrumsp.）、卵囊藻（Oocystis sp.）、小环藻（Cyclotella sp.）等；TC模式池塘的微藻优势属单一，分别以盘星藻、小球藻（Chlorella sp.）和微囊藻（Microcystis sp.）占优势；DY模式池塘的微藻多样性丰富，以小球藻、栅藻（Scenedesmus sp.）、盘星藻、卵囊藻、刚毛藻（Cladophora sp.）等绿藻和小环藻、菱形藻（Nitzschia sp.）等硅藻为优势藻。蓝藻生物量与水体中硝酸盐氮（NO₃^--N）、亚硝酸盐氮（NO₂^--N）、化学需氧量（COD）浓度呈显著正相关（P<0.05）。研究表明，宁夏地区夏季温度高、光照时间长，池塘水体中C、N营养高，易形成以微囊藻、拟鱼腥藻等有害蓝藻优势种群；调控池塘水质时应将其作为关键控制点之一，防控有害藻华暴发而导致减产降效的不良状况发生。

关键词：微藻群落 , 水质 , 宁夏 , 盐碱水池塘

渔用氧化剂对水源水和池塘水中磺胺类抗性基因sul1的去除作用

赵晓雨 , 苏浩昌 , 徐煜 , 徐武杰 , 胡晓娟 , 文国樑 , 曹煜成 , 余招龙

南方水产科学 , 2021, 17(3):46-. doi:10.12131/20200231

摘要：为探讨利用渔用氧化剂去除养殖水体环境中的抗生素抗性基因 (Antibiotic resistant genes, ARGs) 并控制其传播的可行性，该研究以磺胺类抗性基因sul1作为目标抗性基因，选用次氯酸钠 (NaClO)、二溴海因 (C₅H₆Br₂N₂O₂) 和高锰酸钾 (KMnO₄) 3种养殖中常用的渔用氧化剂，运用实时荧光定量PCR技术，分析目标渔用氧化剂对水源水和池塘水体中ARGs的去除效果。结果显示，测试的水源水和池塘水体中的sul1浓度均处于较高水平，分别达到了10⁵和10⁶ 拷贝·mL⁻¹，而且微生物的细胞内sul1是其主要存在形式；其次，NaClO对各实验组中的sul1均呈现较强的去除效果，C₅H₆Br₂N₂O₂仅对水源水中细胞内和细胞外的sul1具有较强的去除作用，KMnO₄仅对不同水体中的细胞外sul1具有较强的去除作用。结果表明，3种目标渔用氧化剂中，NaClO对水源水和池塘水体中ARGs的去除效果最好，科学应用NaClO有利于去除水产养殖水环境中的ARGs，进而防控其在养殖过程中的传播。

关键词：抗生素抗性基因 , 渔用氧化剂 , 次氯酸钠 , 二溴海因 , 高锰酸钾

不同培养条件下菌株NB5对氨氮的去除效果研究

胡晓娟 , 文国樑 , 田雅洁 , 苏浩昌 , 徐武杰 , 徐煜 , 许云娜 , 曹煜成

南方水产科学 , 2020, 16(6):89-. doi:10.12131/20200061

摘要：文章研究了从硝化菌群中分离的菌株NB5在不同培养条件下的生长情况及其对氨氮 (NH₄ ⁺-N) 和亚硝氮 (NO₂ ⁻-N) 的去除效果，并对菌株NB5进行了鉴定。结果发现，菌株NB5在盐度25~45、pH 6.0~9.0、15~35 ℃和通气量1~2 L·min⁻¹的条件下生长良好 (P>0.05)。在盐度45、35和25条件下对NH₄ ⁺-N的最大去除率分别为96.24%、88.93%和75.08%；pH 7.5和9.0条件下分别为99.53%和99.37%；温度30、25、15和35 ℃条件下分别为99.53%、97.22%、97.29%和71.26%；通气量为2和1 L·min⁻¹时分别为99.87%和99.82%。在上述培养条件下菌株NB5对NH₄ ⁺-N的最大去除率均显著高于对照组和其他条件组 (P<0.05)。菌株NB5在不同培养条件下对NO₂ ⁻-N浓度变化无显著作用 (P>0.05)。经16S rDNA序列分析，菌株NB5鉴定为海水硝酸盐还原菌 (Nitratireductor aquimarinus)。研究表明，菌株NB5具有较好的环境适应性和氨氮去除效果，尤其适合中高盐度 (25~45) 养殖池塘环境。

关键词：海水硝酸盐还原菌 , 氨氮 , 培养条件