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孙明玉 , 冯博 , 张昭寰 , 徐马俊坤 , 刘伟奇 , 刘海泉 , 潘迎捷 , 赵勇

水产学报 , 2018, 42(3):410-. doi:10.11964/jfc.20170510847

摘要：针对12株引起凡纳滨对虾急性肝胰腺坏死病(AHPND)的致病性副溶血弧菌，运用多位点测序技术，分析致病菌株的遗传特征。实验选择副溶血弧菌的7个管家基因dnaE、gyrB、recA、dtdS、pntA、pyrC及tnaA，对12株AHPND致病菌扩增测序。将核酸序列上传至PubMLST数据库进行比对后获得每株菌的序列型。收集其他地区AHPND致病性副溶血弧菌的多位点序列分型（MLST）数据，采用eBURST V3及MEGA 5.0软件进行遗传进化分析。结果显示，2014年中国广东分离的AHPND致病株属于一个新序列型ST1710(42、134、99、79、141、41、51)，仅与库中ST415及ST975同源性较高。目前，急性肝胰腺坏死致病株的9种ST型可归为2个克隆组和5个单体。经系统发育树进一步分析可知新序列型ST1710与单体ST975遗传关系相近。本研究首次报道中国AHPND分离株的序列型，丰富了PubMLST数据库，并为其遗传进化研究奠定了理论基础。

关键词：凡纳滨对虾 , 急性肝胰腺坏死病 , 副溶血弧菌 , 多位点序列分型(MLST)

巴氏消毒及冷藏温度作用下副溶血弧菌菌株失活异质性的比较

俞文英 , 张昭寰 , 钱慧 , 刘海泉 , 王敬敬 , Pradeep K MALAKAR , 陈雪 , 潘迎捷 , 赵勇

上海海洋大学学报 , 2020, 29(3):420-. doi:10.12024/jsou.20190302568

摘要：温度是影响细菌生长与失活的关键因素，在食品生产中常用来控制致病微生物潜在的风险。但由于不同菌株间个体的差异，细菌在相同温度作用下呈现出不同的失活趋势，这种行为方式称为菌株的失活异质性，容易导致微生物风险控制的不确定性和变异性。比较了19株副溶血性弧菌（16株临床菌株和3株环境菌株）在巴氏消毒温度（65℃）及冷链温度（10℃）作用下的失活情况，并结合Weibull模型，拟合相应的失活参数（t_R值），探究了不同菌株间的失活异质性。在65℃处理条件下，19株副溶血性弧菌的t_R值介于22.62~67.23 s，VPC-1为耐热性最强菌株，而VPC-10为耐热性最弱菌株，热失活参数t_R值最适的概率分布为Normal （44.82，12.27）。在10℃条件下，t_R值介于113.96~371.38 h，VPC-3为耐冷性最强菌株，VPC-2为耐冷性最弱菌株，冷失活参数t_R值最适的概率分布为Loglogistic （51.45，148.88，4.67）。结果表明，副溶血性弧菌的热失活和冷失活间没有显著的相关性，菌株的失活异质性广泛存在于副溶血性弧菌之中，仅基于单一菌株进行失活模型的拟合，很难描述其整体的失活趋势。同时，初步构建了菌株失活异质性的随机模型，并使用概率分布代替了传统的失活参数。

关键词：副溶血性弧菌 , 巴氏消毒温度 , 冷链温度 , 失活异质性 , Weibull模型

副溶血弧菌Ⅵ型分泌系统对其种内竞争的影响

穆丽丽 , 牛犇 , 张昭寰 , 王思琦 , 王敬敬 , 刘海泉 , 潘迎捷 , 赵勇

上海海洋大学学报 , 2020, 29(3):429-. doi:10.12024/jsou.20190402602

摘要：对85株副溶血弧菌的Ⅵ型分泌系统（type Ⅵ secretion system，T6SS）相关基因的携带情况进行分析，并选取部分副溶血弧菌菌株进行混合培养，探究其种内竞争情况。利用qPCR技术，分析混合培养后T6SS相关基因的表达情况。结果表明：85株副溶血弧菌均携带T6SS2，62株副溶血弧菌携带T6SS1，其中临床分离株41株，占全部临床分离株的93.2%；环境分离株21株，占全部临床分离株的51.2%，并且T6SS1基因簇在不同来源的副溶血弧菌中存在一定的差异性。在混合培养条件下，部分T6SS1⁺的副溶血弧菌存在明显的种内竞争优势。基因表达分析结果显示，较单一培养的菌株，混合培养中副溶血弧菌T6SS1和T6SS2相关基因的表达量均有明显的上调。导致这一现象的原因可能是在混合培养的条件下，副溶血弧菌可通过增强自身T6SS1和T6SS2相关基因的表达，以提升其在种内的竞争力。初步探究了副溶血弧菌Ⅵ型分泌系统对其种内竞争的影响，为副溶血弧菌T6SS功能的进一步揭示提供科学的参考。

关键词：副溶血弧菌 , T6SS , 种内竞争 , 定量PCR , 基因表达

不同振动模式对副溶血性弧菌生物被膜形成的影响

齐家伟 , 董旭日 , 柴旭锋 , 韩乔 , 张昭寰 , 檀玲 , 刘海泉 , 潘迎捷 , 赵勇

上海海洋大学学报 , 2020, 29(6):950-. doi:10.12024/jsou.20190402619

摘要：为了探究食品工厂环境下更为真实的生物被膜形成过程，有效地预防和控制食品加工过程中副溶血性弧菌生物被膜的污染情况，通过模拟不同的食品加工器械振动模式（水平旋转式振动、翘板式振动、垂直翻转式振动），研究不同振动模式下副溶血性弧菌在玻璃和不锈钢表面培养72 h生物被膜的形成过程，分析不同振动模式对被膜生物量、被膜结构以及被膜胞外基质中胞外多糖和胞外蛋白的影响。结果发现：振动条件下副溶血性弧菌被膜形成量明显减少；3种振动模式下垂直翻转式振动条件下被膜生成量最少；同种振动方式下副溶血性弧菌在不锈钢表面形成量大于玻璃表面；增加水平旋转转速，被膜生成量减少；振动导致被膜总生物量减少，多孔性和均一性增加，生物被膜结构趋于简单，被膜比较分散。振动导致生物被膜胞外多糖和胞外蛋白含量减少。结果表明：不同的器械振动对被膜的影响不同，本研究模拟的3种振动模式中选择垂直翻转式振动模式可以有效地减少与抑制生物被膜的生长；振动会导致细菌生物被膜胞外多糖和蛋白的减少，影响被膜的孔径、均一性等结构特性，被膜结构变得松散，被膜生成量减少。

关键词：生物被膜 , 副溶血性弧菌 , 振动 , 结构

2001-2013年中国重大食物中毒事件的分析评价

杜苏萍 , 王敬敬 , 张昭寰 , 孙晓红 , 潘迎捷 , 赵勇

上海海洋大学学报 , 2016, 25(2):306-. doi:

摘要：为了深入了解我国重大食物中毒事件的发生特征,采用时间序列季节分解法、变异度值、t值检验等分析方法对我国2001-2013年重大食物中毒事件发生数量、死亡人数、中毒因素、中毒场所等通报数据进行分析评价。结果显示:我国重大食物中毒事件发生数量、死亡人数自2006年起均具有逐年下降的趋势,且呈明显的季节周期性,其中第三季度是中毒事件发生数量最多、造成危害程度最严重的季度。对比引起食物中毒的因素,化学因素是造成生命危害程度最大的因素,但深度分析可知,微生物因素应是未来食品安全防控的重点。中毒场所的比对分析中,家庭场所发生食物中毒的后果最为严重。本研究采用多元数学统计方法对食物中毒事件进行细致、全面的分析,充分揭示了当前我国食物中毒事件发生的总体状况以及未来潜在发展趋势。

关键词：重大食物中毒事件 , 时间序列季节分解法 , 变异系数 , t值检验

混合培养对副溶血性弧菌致病株和非致病株生长的影响

徐马俊坤 , 冯博 , 张昭寰 , 孙晓红 , 潘迎捷 , 赵勇

上海海洋大学学报 , 2017, 26(5):776-. doi:10.12024/jsou.20170502041

摘要：以9∶1和1∶1的比例对致病性副溶血性弧菌（ATCC 33847：tdh+/trh-/tlh+；ATCC 17802：tdh-/trh+/tlh+）和非致病性副溶血性弧菌（G2：tdh-/trh-/tlh+；G8：tdh-/trh-/tlh+）在TSB培养基和熟虾中分别进行了混合和37 ℃10 h的混合培养，通过菌落原位杂交技术和PCR技术检测致病性菌株在混合培养前后的比例。结果显示，在TSB和熟虾中，致病菌比例均出现了下降。在熟虾样品中致病菌株下降的比例更高，其中ATCC17802和G8在熟虾样品中以9∶1比例混合并混合培养10 h后，致病菌比例从90%降为0。表明混合培养对致病性副溶血性弧菌菌株生长产生不利的影响，是造成水产样品中副溶血性弧菌感染频发却很难分离到致病性菌株的原因之一。

关键词：副溶血性弧菌 , 致病性 , 原位杂交 , 菌落杂交

人造海鲜的研究进展与展望

赵勇 , 王凡 , 张昭寰 , 潘迎捷 , 欧杰 , 刘海泉

水产学报 , 2020, 44(10):1-. doi:10.11964/jfc.20200412239

摘要：由于人类的过度捕捞以及环境污染问题，海洋生态系统遭受了极大的破坏，海洋渔业的可持续发展面临诸多挑战。为了满足市场的需求，发达国家投入大量资金进行人造海鲜的研究。人造海鲜肉主要分为两种，一种是从植物中提取优质蛋白、脂肪、色素等合成的植物基海鲜肉，另一种是通过获取海洋生物的干细胞增殖分化而来的培养海鲜肉。通过研究发现，干细胞培养而来的海鲜肉在口感和风味上更接近真实海鲜肉。目前人造海鲜肉需要较高的技术要求和生产成本，且生产出来的产品在口感上与真实海鲜肉存在较大差异。本文对两种来源的人造海鲜肉进行了总结，分析了人造海鲜制作过程中重点关注的问题，关注了3D打印技术在食品行业中的应用，以期能够为我国人造肉在海鲜产品中的研究应用提供参考。

关键词：人造海鲜 , 植物蛋白 , 细胞培养 , 3D打印技术

应用酸性电解水联合超声波杀灭副溶血性弧菌

许愈 , 张昭寰 , 赵莉 , 刘海泉 , 潘迎捷 , 赵勇

上海海洋大学学报 , 2020, 29(4):578-. doi:10.12024/jsou.20190402604

摘要：将酸性电解水与超声波技术相结合，探究其对副溶血性弧菌的杀灭情况，并与其他杀菌措施进行对比。采用平板计数法进行菌落计数，扫描电镜观察细菌的形态变化，蛋白质泄漏揭示细胞膜通透性差异，并结合流式细胞仪分析生物学特征的改变，分别比较了酸性电解水、超声波以及联合处理对副溶血性弧菌的杀菌效果。结果显示：酸性电解水联合超声波处理可使副溶血性弧菌的数量减少2.09 log CFU/mL，亚致死菌数量为1.80 log CFU/mL，而仅用超声波处理，细菌只减少了0.63 log CFU/mL，亚致死菌数量为0.05 log CFU/mL（P<0.05）。扫描电镜结果表明，电解水联合超声波处理对副溶血性弧菌的细胞结构有明显的破坏作用，结合二喹啉甲酸法（BCA）显示其细胞内蛋白质泄漏226.596 μg/mL（P<0.05）。进一步的流式细胞仪分析结果显示，经联合处理后细菌细胞明显缩小，颗粒度变化增大。综上所述，相较于酸性电解水或超声波单一处理，通过菌落计数，细菌的形态变化，蛋白质泄漏与细胞生物学特征的改变可知，酸性电解水联合超声波的处理方式具有更强的杀菌效果，可作为一种新型的技术应用于水产品中副溶血性弧菌的杀灭。

关键词：副溶血性弧菌 , 酸性电解水 , 超声波 , 杀菌效果