2018, 23(2): 91-98.
Keywords： Haliotis diversicolor , reference gene , stability
内参基因的稳定性对实时定量PCR的结果影响巨大。采用GeNorm、normFinder和RefFinder三款软件比较了鲍变态和干扰幼虫甲状腺激素受体（TR）两种情况下内参基因的稳定性。软件分析了EIF5A、OAZ1、YB1、RPL3、RPS9和ACT等6个候选内参基因的Ct值，据此获得各基因的稳定值。在杂色鲍幼虫的变态过程中，EIF5A稳定性最高，排名平均数为1，表明该基因可以作为这一阶段实时定量PCR的内参基因，但是在干扰TR情况下，EIF5A的稳定性下降，排名平均数为3.91。RPS9则与之相反，在变态过程该基因表达稳定性最差，而在干扰TR时表达稳定性最好。ACT在两种情况下稳定性较好，排名平均数均位列第二位，可以作为这两种情况下的通用内参基因。其他基因的稳定性在这两种情况下也发生剧烈变换。这表明内参基因的稳定与样品具体处理情况关系密切。为了保证定量PCR结果的准确性，需要针对具体处理情况相应地进行内参基因的稳定性评估。
内参基因的稳定性对实时定量PCR的结果影响巨大。采用GeNorm、normFinder和RefFinder三款软件比较了鲍变态和干扰幼虫甲状腺激素受体（TR）两种情况下内参基因的稳定性。软件分析了EIF5A、OAZ1、YB1、RPL3、RPS9和ACT等6个候选内参基因的Ct值，据此获得各基因的稳定值。在杂色鲍幼虫的变态过程中，EIF5A稳定性最高，排名平均数为1，表明该基因可以作为这一阶段实时定量PCR的内参基因，但是在干扰TR情况下，EIF5A的稳定性下降，排名平均数为3.91。RPS9则与之相反，在变态过程该基因表达稳定性最差，而在干扰TR时表达稳定性最好。ACT在两种情况下稳定性较好，排名平均数均位列第二位，可以作为这两种情况下的通用内参基因。其他基因的稳定性在这两种情况下也发生剧烈变换。这表明内参基因的稳定与样品具体处理情况关系密切。为了保证定量PCR结果的准确性，需要针对具体处理情况相应地进行内参基因的稳定性评估。
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