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2019, 9(4): 30-35. doi: 10.3969/j.issn.2095-1833.2019.04.005

水产品中孔雀石绿BA-ELISA检测方法的建立及应用

1. 中国水产科学研究院东海水产研究所, 上海 200090;

2. 上海理工大学环境与建筑学院, 上海 200093

收稿日期:2019-04-01
修回日期:2019-06-24

基金项目:   中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(2016T09) 

关键词: 孔雀石绿 , 水产品 , 生物素-链霉亲和素 , 酶联免疫吸附法

Establishment and application of BA-ELISA for malachite green detection in aquatic products

1. East China Sea Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fishery Sciences, Shanghai 200090, China;

2. School of Environment and Architecture, University of Shanghai for Science and Technology, Shanghai 200093, China

Received Date:2019-04-01
Accepted Date:2019-06-24

Keywords: malachite green , aquatic products , biotin-streptavidin , enzyme-linked immunosorbent assay

摘要

建立了基于生物素-链霉亲合素放大的酶联免疫吸附法(BA-ELISA)检测水产品中的孔雀石绿(MG)含量的方法。优化了包被原和生物素化抗体的工作浓度,以及封闭液、温育时间、pH值和盐离子强度等实验条件。结果显示,最佳实验条件为:包被原和生物素化抗体的稀释倍数均为1∶2 000,封闭液为1%明胶,抗原抗体反应时间为60 min,缓冲液的pH值为7.0,盐离子强度为0.1 mol/L。在此条件下,该方法的线性范围为0.05~20.00 ng/mL,检出限(LOD)为0.037 μg/kg,回收率为83.5%~115.0%,变异系数(CV)为4.53%~13.80%。将该方法用于实际样品的分析检测,检测结果与LC/MS相比,具有较好的相关性。上述结果表明,本实验建立的方法灵敏度高,特异性和稳定性较好,可用于水产品中MG的分析筛查。

建立了基于生物素-链霉亲合素放大的酶联免疫吸附法(BA-ELISA)检测水产品中的孔雀石绿(MG)含量的方法。优化了包被原和生物素化抗体的工作浓度,以及封闭液、温育时间、pH值和盐离子强度等实验条件。结果显示,最佳实验条件为:包被原和生物素化抗体的稀释倍数均为1∶2 000,封闭液为1%明胶,抗原抗体反应时间为60 min,缓冲液的pH值为7.0,盐离子强度为0.1 mol/L。在此条件下,该方法的线性范围为0.05~20.00 ng/mL,检出限(LOD)为0.037 μg/kg,回收率为83.5%~115.0%,变异系数(CV)为4.53%~13.80%。将该方法用于实际样品的分析检测,检测结果与LC/MS相比,具有较好的相关性。上述结果表明,本实验建立的方法灵敏度高,特异性和稳定性较好,可用于水产品中MG的分析筛查。

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