2022, 42(5): 38-44. doi: 10.3969/j.issn.1673-9159.2022.05.005
关键词： 墨吉明对虾 , 高血糖激素 , CHH神经肽 , 基因表达
Keywords： Fenneropenaeus merguiensis , crustacean hyperglycemic hormone , CHH neuropeptide , gene expression
【目的】研究墨吉明对虾（Fenneropenaeus merguiensis）高血糖激素基因FmCHH-I的分子特征和表达规律。【方法】根据转录组信息设计特异性引物，克隆FmCHH-I基因序列，并利用生物信息学手段预测其氨基酸和蛋白结构。采用实时荧光定量PCR方法分析该基因在不同组织中和卵巢发育不同时期的表达情况，以及切除单侧眼柄对其表达的影响。【结果与结论】成功克隆墨吉明对虾高血糖激素基因FmCHH-I的序列。该基因cDNA全长599 bp，开放阅读框（ORF）长为369 bp，编码123个氨基酸。蛋白序列的1～20位包含一个信号肽，随后有一段由26个氨基酸组成的前导肽，末端为成熟肽，包含74 个氨基酸以及6 个半胱氨酸残基。FmCHH-I 基因与斑节对虾（Penaeus monodon）CHH-I 基因同源性最高（91.53%），与欧洲龙虾（Homarus gammarus）CHH-I 基因同源性最低（43.86%）。系统发育分析表明，FmCHH-I 与斑节对虾聚在一起，与对虾科物种聚为一支。FmCHH-I 在眼柄中的表达量最高，在肝胰腺、肠道中也有表达。FmCHH-I 在性腺未发育期和性腺成熟期雌性对虾眼柄中的表达量无显著差异（P > 0.05），但切除眼柄后，卵巢中FmCHH-I的表达量显著上调（P < 0.01）。
【目的】研究墨吉明对虾（Fenneropenaeus merguiensis）高血糖激素基因FmCHH-I的分子特征和表达规律。【方法】根据转录组信息设计特异性引物，克隆FmCHH-I基因序列，并利用生物信息学手段预测其氨基酸和蛋白结构。采用实时荧光定量PCR方法分析该基因在不同组织中和卵巢发育不同时期的表达情况，以及切除单侧眼柄对其表达的影响。【结果与结论】成功克隆墨吉明对虾高血糖激素基因FmCHH-I的序列。该基因cDNA全长599 bp，开放阅读框（ORF）长为369 bp，编码123个氨基酸。蛋白序列的1～20位包含一个信号肽，随后有一段由26个氨基酸组成的前导肽，末端为成熟肽，包含74 个氨基酸以及6 个半胱氨酸残基。FmCHH-I 基因与斑节对虾（Penaeus monodon）CHH-I 基因同源性最高（91.53%），与欧洲龙虾（Homarus gammarus）CHH-I 基因同源性最低（43.86%）。系统发育分析表明，FmCHH-I 与斑节对虾聚在一起，与对虾科物种聚为一支。FmCHH-I 在眼柄中的表达量最高，在肝胰腺、肠道中也有表达。FmCHH-I 在性腺未发育期和性腺成熟期雌性对虾眼柄中的表达量无显著差异（P > 0.05），但切除眼柄后，卵巢中FmCHH-I的表达量显著上调（P < 0.01）。
| [1] | OLLIVAUX C, SOYEZ D.Dynamics of biosynthesis and release of crustacean hyperglycemic hormone isoforms in the X-organ-sinus gland complex of the crayfish Orconectes limosus[J].European Journal of Biochemistry, 2000, 267(16):5106-5114. |
| [2] | 水燕,史永红,徐增洪,等.眼柄切除快速诱导甲壳动物生长发育研究进展[J].广东农业科学, 2013, 40(21):124-126. |
| [3] | FUNAOKA S, SAKATA H.Untersuchungen über das periphere nervensystem[J].Folia Anatomica Japonica, 1931, 9(3/4):309-310. |
| [4] | KELLER R.Crustacean neuropeptides:structures, functions and comparative aspects[J].Experientia, 1992, 48(5):439-448. |
| [5] | HUBERMAN A, AGUILAR M B, BREW K, et al.Primary structure of the major isomorph of the crustacean hyperglycemic hormone (CHH-I) from the sinus gland of the Mexican crayfish Procambarus bouvieri(Ortmann):Inter species comparison[J].Peptides, 1993, 14(1):7-16. |
| [6] | 张宗锋,张文博,刘利平.湛江凡纳滨对虾的养殖现状及持续发展对策[J].广东农业科学, 2012, 39(14):158-160. |
| [7] | 蔡生力.甲壳动物内分泌学研究与展望[J].水产学报, 1998, 22(2):154-161. |
| [8] | 史黎黎,周婷婷,李逸群,等.墨吉明对虾c型溶菌酶基因的克隆及表达[J].广东海洋大学学报, 2017, 37(3):8-13. |
| [9] | 周婷婷.墨吉明对虾胰岛素样促雄性腺激素基因(FmIAG)的分子特征研究[D].湛江:广东海洋大学, 2018. |
| [10] | 杨世平,陆启顺,陈荣,等.丁香酚对墨吉明对虾的麻醉效果[J].广东海洋大学学报, 2017, 37(4):16-20. |
| [11] | 金舒博,王宁,乔慧,等.青虾高血糖激素基因全长cDNA序列的克隆及表达分析[J].中国水产科学, 2013, 20(1):82-92. |
| [12] | KUO C M, HSU C R, LIN C Y.Hyperglycaemic effects of dopamine in tiger shrimp, Penaeus monodon[J].Aquaculture, 1995, 135(1/2/3):161-172. |
| [13] | KUO C M, YANG Y H.Hyperglycemic responses to cold shock in the freshwater giant prawn, Macrobrachium rosenbergii[J].Journal of Comparative Physiology B, 1999, 169(1):49-54. |
| [14] | LIU M Q, PAN L Q, LI L, et al.Molecular cloning, characterization and recombinant expression of crustacean hyperglycemic hormone in white shrimp Litopenaeus vannamei[J].Peptides, 2014, 53:115-124. |
| [15] | SEDLMEIER D.The crustacean hyperglycemic hormone (CHH) releases amylase from the crayfish midgut gland[J].Regulatory Peptides, 1988, 20(2):91-98. |
| [16] | LEE K J, DORAN R M, MYKLES D L.Crustacean hyperglycemic hormone from the tropical land crab, Gecarcinus lateralis:Cloning, isoforms, and tissue expression[J].General and Comparative Endocrinology, 2007, 154(1/2/3):174-183. |
| [17] | CHEN H Y, TOULLEC J Y, LEE C Y.The crustacean hyperglycemic hormone superfamily:progress made in the past decade[J].Frontiers in Endocrinology, 2020, 11:578958. |
| [18] | CHANG E S.Stressed-out lobsters:crustacean hyperglycemic hormone and stress proteins[J].Integrative and Comparative Biology, 2005, 45(1):43-50. |
| [19] | TENSEN C P, DE KLEIJN D P, VAN HERP F.Cloning and sequence analysis of cDNA encoding two crustacean hyperglycemic hormones from the lobster Homarus americanus[J].European Journal of Biochemistry, 1991, 200(1):103-106. |
| [20] | DE KLEIJN D P, JANSSEN K P, WADDY S L, et al.Expression of the crustacean hyperglycaemic hormones and the gonad-inhibiting hormone during the reproductive cycle of the female American lobster Homarus americanus[J].The Journal of Endocrinology, 1998, 156(2):291-298. |
| [21] | 王吉桥,徐锟.对虾对营养物质的需要量[J].大连水产学院学报, 2002, 17(3):196-208. |
| [1] | 陈晶, 聂青, 刘妍. 《WHO基本药物示范目录》与我国《国家基本药物目录》动态调整程序比较与借鉴.水产学报,2015(3): 289-293.doi:10.3866/PKU.WHXB201503022 |
